Wat er werkelijk natriumfluoresceïne vlekken? nieuwe inzichten uit het hoornvlies indruk cytologie

Chemie Admin November 26, 2016 0 11
FONT SIZE:
fontsize_dec
fontsize_inc

Cameron Postnikoff is momenteel het nastreven van een masc bij het ontwerpen van technische systemen aan de Universiteit van Waterloo, Canada.

Natriumfluoresceïne werd gebruikt als oculaire gezondheid oppervlak oftalmische indicator kleurstof en meer dan 100 jaar1. Fluoresceïne het oogoppervlak werd toen "corneale kleuring, 'maar deze kleuring is meestal presenteert als een aspect van fluorescente stippen, bekend als kleurstoffen inzet. Historisch gezien, werd natrium fluoresceïne vermoedelijk het resultaat van een van de drie mechanisms2: bevordering bundelen gebieden cellen werpen, de ingang rond cellen door het verlies van tight junctions of dode cellen of schilferen. Hieronder volgt een overzicht van een artikel 2011 door Mokhtarzedeh et al 3, waarvan is aangetoond dat deze historische theorieën tegenspreken.

Mokhtarzadeh M, Casey R, Glasgow BJ. Fluoresceïne kleuring episode herleid tot oppervlakkige cornea-epitheelcellen door indruk cytologie en confocale microscopie. Investeer Ophthalmol Vis Sci 2011; 52: 2127-2135.

Van kleuring met fluoresceïne op het cellulaire niveau te evalueren, Glasgow ontwikkelde een methode indruk cytologie die een membraan tot een zeer klein formaat wordt gesneden en vervolgens in het hoornvlies ingedrukt om de epitheelcellen, waarvan sommige vooraf gekleurd met fluoresceïne verwijderen. Het membraan wordt opgetild en de cornea om de cellen gehecht aan het membraanfilter onderzoeken behandeld. Biomicroscopy wordt vervolgens uitgevoerd om te onderzoeken of de gestippelde vlekken zijn nog steeds aanwezig op het oogoppervlak.

optimalisering van methoden

Hun protocol indruk cytologie optimaliseren, werden verschillende membranen getest op hun effectiviteit in de verwijdering van de cellen. In een kleine pilot-studie, Thinda et al. eerste gemengde esters van cellulose membranen ten opzichte van polycarbonaat membranen en toonde aan dat, terwijl het polycarbonaat membranen gemakkelijker en schoner nabewerking kunnen bieden, het polycarbonaat membranen hadden een verminderde rendement4 Cell. Mokhtarzedeh et al. vergeleken vele verschillende glas, polymeer en het cellulose membranen van de eerste naar hun vermogen om cellen van de buccale mucosa te verwijderen (in wang) beoordelen. Alleen de membranen die hoge celopbrengst vertoonden, werden vervolgens toegepast op het hoornvlies. Voor de cornea zijn polytetrafluorethyleen (PTFE) membraan de grootste belofte voor de combinatie van celopbrengst en het vermogen te herkennen zijn. De imprint cytologie proces met kleine PTFE membranen van de orde van 2-3 mm heeft tot nu toe bewezen veilig te zijn en kan worden exfoliativa als een kampioen met Schirmer strips (persoonlijke communicatie, Glasgow, juni 2013).

waarnemingen

Fluoresceïne werd ingeprent op het oog oppervlak en kleine cornea epitheliale gebieden werden uit de indruk cytologie, waardoor Mokhtarzedeh maken enkele opmerkingen over de plekken verwijderd:

  • Meestal puntvormige vlekken verwijderd door impression cytologie gedetecteerd van de cornea naar een bepaalde cel op het membraan. Voor een paar punten, was het niet mogelijk voor hen om terug naar de celmembraan, wat kan betekenen dat er wellicht af en toe punten van pooling gaan. Aangezien deze niet-traceerbare vlekken vertegenwoordigen een minderheid, de afwezigheid van cellen in de verwachte locatie op het membraan kan ook door behandeling van de membraan.
  • Op het membraan was natriumfluoresceïne gelokaliseerd aan de cellen en niet de intercellulaire ruimten; in het bijzonder, was er een negatieve kleuring in de penetratie rond cellen op cytologisch membraan. Confocale microscopie van gekleurde cellen fluoresceïne cornea transplantaten van patiënten met keratitis punctata en droge ogen ook gebleken dat het fluoresceïne was in het cytoplasma en geen kernen cel.
  • Natrium fluoresceïne werd voornamelijk gezien in cellen van de oppervlaktelaag, maar de met fluoresceïne gekleurde cellen kunnen worden gevonden in maximaal de eerste drie lagen van het hoornvliesepitheel. Mokhtarzedeh et al. Merk op dat als de membraan drie tot vijf seconden toegepast, een monolaag van cellen zou verdwijnen. toepassing van langdurige membraan van 20 tot 30 seconden zou vervolgens verwijderen cellagen. Fluoresceïne niet volledig verdwijnt de cornea na een monolaag van cellen werd verwijderd, maar heffen meer lagen van epitheelcellen kon alle punctata vlekken te verwijderen op het hoornvlies. Dit impliceert dat de huidcellen niet de enige verantwoordelijke voor het antwoord corneale kleuring.

De kleuring mechanisme

Terwijl de Mokhtarzedeh resultaten bij patiënten met droge ogen werden verkregen, de resultaten leveren nieuw bewijs in die cellen daadwerkelijk kleuren met fluoresceïne en hun correspondentie met de point-achtige stippen die op de spleetlamp in acht worden genomen. Deze studie levert het bewijs dat de klassieke mechanismen voorgesteld om verkleuring van de cornea (pooling, de entree, en dode cellen) beschrijven geen getrouw beeld geven van natrium fluoresceïne kleuring. editorial van Dr. Maud Gorbet schetst een aantal van de in vitro en ex vivo onderzoeken die zijn uitgevoerd om beter inzicht in de mechanismen geïnduceerde verkleuring van de cornea-oplossing (SICS). Deze cellulaire studies bevestigen de opmerkingen van Mokhtarzedeh en impliceren dat het mechanisme van kleuring met fluoresceïne vergelijkbaar tussen droge ogen en SICS zijn. Het is echter nog nader te bepalen wat de oorzaak corneale epitheelcellen kleuring met natriumfluoresceïne. In elk geval wordt verkleuring van de cornea niet beperkt tot een responsoppervlak epitheellaag, als bijdrage van fluoresceïne gekleurde cellen zich dieper in het hoornvlies lagen bij patiënten met droge ogen.

conclusie

Met voortdurende verbetering van het begrijpen van biologische processen en cellulaire transport van natriumfluoresceïne, kan fluoresceïne interactie met de cornea veel beter begrepen. Uiteindelijk zal dit ons toelaten om beter te contextualiseren verkleuring van de cornea en de koppeling biocompatibiliteit.

Ik zou van harte willen bedanken Dr. Ben Glasgow van UCLA voor inzichtelijke discussie over het onderzoek van zijn groep.

Referenties

1. De Schweinitz GE. Ziekten ogen: Een handboek van oogheelkundige praktijk. 1st ed. Philidelphia, PA: W.B. Saunders; 1893.
2. Morgan PB, Maldonado-Codina C. verkleuring van de cornea: Hebben we echt begrijpen wat we zien? Cont voor de lens van het oog 2009; 32: 48-54.
3. Mokhtarzadeh M, Casey R, Glasgow BJ. Fluoresceïne kleuring episode herleid tot oppervlakkige cornea-epitheelcellen door indruk cytologie en confocale microscopie. Investeer Ophthalmol Vis Sci 2011; 52: 2127-2135.
4. Thinda S, PK Sikhs, Hopp LM, Glasgow BJ. Polycarbonaat membraan indruk cytologie: bewijs voor fluoresceïne kleuring in normale hoornvlies en droge ogen. Br J Ophthalmol 2010; 94: 406-409.

(0)
(0)