Hoe weet je of je een Gramkleuring goed hebt gedaan?

Chemie Admin November 12, 2016 0 20
FONT SIZE:
fontsize_dec
fontsize_inc

De Gram kleuring, vernoemd naar de Deense bacterioloog die oorspronkelijk bedacht in 1882 (gepubliceerd 1884), Hans Christian Gram, is één van de belangrijkste kleur in de microbiologie technieken. Het is bijna altijd de eerste test uitgevoerd voor de identificatie van bacteriën. De belangrijkste plek in de methode van de Gram is kristalviolet. Crystal violet wordt soms vervangen door methyleenblauw, even effectief. De micro-organismen die het kristal violet jodium-complex te houden verschijnen paars bruin onder microscopisch onderzoek. Deze micro-organismen die zijn gekleurd met Gram werkwijze worden gewoonlijk geclassificeerd als Gram-positieve of Gram-negatieve niet. Anderen die niet zijn gekleurd door de paarse kristallen worden aangeduid als Gram-negatieve, en lijken rood.

Gramkleuring is gebaseerd op het vermogen van de celwand van bacteriën aan de kleurstof kristalviolet tijdens behandeling met oplosmiddel te houden. De wanden van de Gram-positieve micro-organismen cellen hebben een hogere peptidoglycaan en lipidegehalte hoger dan gramnegatieve bacteriën. celwanden van bacteriën worden gekleurd met kristalviolet. De jodium wordt vervolgens toegevoegd als beitsmiddel voor de paarse complex kristal jodium zodat de kleurstof niet gemakkelijk kan worden verwijderd vormen. Deze stap wordt gewoonlijk aangeduid als de kleurstof oplossen. Daaropvolgende behandeling met een witmaker, een gemengd oplosmiddel van ethanol en aceton, lost de lipidelaag van gram-negatieve cellen. De verwijdering van de lipidelaag verhoogt de uitloging van de primaire vlek van de cellen in het omringende oplosmiddel. Integendeel, het oplosmiddel droogt de dikke Grampositieve celwanden, het sluiten van de poriën als de celwand krimpt tijdens dehydratatie. Hierdoor wordt de verspreiding van de violette-jood complex geblokkeerd, en de bacteriën blijven bevlekt. De lengte van de verkleuring is cruciaal om tussen gram-positieve bacteriën Gram-negatieve bacteriën. Een langdurige blootstelling ontkleurende middel zal de vlek te verwijderen door beide soorten bacteriën. Sommige Gram-positieve bacteriën kunnen hun vlekken gemakkelijk verliezen en dus verschijnt als een mengsel van Gram-positieve en Gram-negatieve (Gram-variabele).

Tenslotte wordt een basisch fuchsine tegenkleuring toegepast op het uitstrijkje sturen gramnegatieve bacteriën ontkleurd roze kleur. Sommige laboratoria gebruiken safranineoplossing als contrast, echter. Basic fuchsine vlekken vele Gram-negatieve bacteriën intenser dan het doet safranineoplossing, waardoor ze makkelijker te zien. Sommige bacteriën die erg gekleurd door safranineoplossing als Haemophilus spp., Legionella spp., En sommige anaërobe bacteriën gemakkelijk gekleurd met basisch fuchsine, maar niet safranineoplossing. Polychromatische de aard van de Gram kleuring maakt de bepaling van de grootte en de vorm van zowel Gram-negatieve en Gram-positieve. Desgewenst kunnen de schuiven permanent gemonteerd en bewaard bijhouden.

Evenals Gramkleuring, zijn er een breed scala aan andere beschikbare kleuring methoden. Gebruik van geschikte kleurstoffen, kunnen verschillende delen van de bacteriën structuren zoals capsules, plagen, granules en sporen worden gekleurd. kleurtechnieken worden wijd gebruikt om de componenten die anders moeilijk te zien onder een optische microscoop worden geopend. Bovendien kunnen speciale vlekken worden gebruikt voor andere micro-organismen niet goed zichtbaar zijn door Gram kleuring, zoals mycobacteriën, rickettsia, spirocheten en andere geven. Daarnaast zijn er modificaties van de Gramkleuring die morfologische analyse van eukaryote cellen in klinische monsters mogelijk.
(0)
(0)