Chemische Medical Corporation: para-terrein

Chemie Admin November 9, 2016 0 28
FONT SIZE:
fontsize_dec
fontsize_inc

introductie | macroscopische | microscopische |

Microscopisch onderzoek - Eicellen en Parasite Exam

introductie | directe uitstrijkje Wet | concentratie | Stained permanente Smear

Stained permanente Smear

introductie | Trichrome Stain | Iron Hematoxylin Stain | Stain gewijzigd ijzer hematoxyline | herzieningsprocedure introductie

De identificatie en correcte identificatie van vele intestinale protozoa vaak afhankelijk van het onderzoek van de gekleurde uitstrijkjes teneinde vaste olie immersie (100 x objectief). Deze dia's niet alleen de microscopist met een permanente registratie van protozoa organismen geïdentificeerd, maar ze kunnen ook worden gebruikt voor het overleg met specialisten, wanneer zij ongebruikelijk zijn morfologische kenmerken. Gezien de morfologische variaties die mogelijk zijn, kunnen de organismen worden gevonden die zeer moeilijk te identificeren zijn en kan het model voor elke soort niet geschikt.

Hoewel een ervaren microscopist af en toe wat lichamen kunnen identificeren op een natte preparaat, moet het grootste deel van de identificaties worden beschouwd als voorlopig tot bevestigd door de Standing gebrandschilderde dia. Kleinere protozoa organismen zijn vaak zichtbaar op de gekleurde uitstrijkjes wanneer zij gemakkelijk alleen rechtstreekse uitstrijkje en concentratie methoden zijn verloren. Om deze redenen is de permanente kleuring aanbevolen voor elk voor een parasiet routineonderzoek (verplicht onderdeel van het examen OR keuze voor een bepaalde vorm kan afhangen van de moeilijkheidsgraad van de procedure en de hoeveelheid tijd die nodig is om de vlek te voltooien. De oudste klassieke methode is de methode van ijzer hematoxyline lange Heidenhain; Voor de diagnostische routinewerk meeste laboratoria één van de kortere procedures, zoals trichroom methode of een van de gemodificeerde met ijzer hematoxyline methoden.

Het merendeel van de problemen bij de kleur van protozoa trofozoiten en cysten in fecale uitstrijkjes optreden omdat de steekproef is te oud, de uitstrijkjes zijn te dicht, worden de uitstrijkjes drogen voordat fixatie, of fixatie onvoldoende is. Er is variatie in de omgeving waarin onvolwassen cysten stellen gemakkelijker dan volwassen cysten en cysten van E. coli hebben een langere fixatie tijd doen dan die van andere soorten.

Bereiding van het materiaal voor het kleuren

vers materiaal

  • Wanneer het monster komt, bereiden een of twee dia's met applicator stokken of borstels en onmiddellijk (zonder drogen) zet ze in een fixeermiddel Schaudinn. Laat de dia's die voor ten minste 30 minuten; fixatie nachts acceptabel. De hoeveelheid fecaal materiaal gesmeerd op het glas moet dun genoeg dat krantenpapier kan worden gelezen door middel van uitstrijkjes zijn. Uitstrijkjes opgeslagen in fixatief Schaudinn vloeistof moet in 70% alcohol worden geplaatst om overtollig fixeermiddel te verwijderen voordat het jodium-alcohol positionering (gebruikt om fixeermiddelen op basis van kwik).
  • Wanneer vers monster vloeibaar is, zet 3 of 4 druppels van PVA op de dia, meng een paar druppels fecaal materiaal met PVA, verspreid het mengsel en laten drogen gedurende enkele uren in een incubator bij 37 ° C of overnacht bij kamertemperatuur temperatuur. Deze methode niet worden gebruikt met semi-gevormde ontlasting of format; zal er voldoende menging tussen de kruk en fixeermiddel zijn.
  • Ga verder met de trichroomkleuring procedure door het plaatsen van de dia's van jodium-alcohol.

PVA materiaal bewaard

  • Ontlasting specimens die worden bewaard in PVA worden toegestaan ​​om het probleem voor minstens 30 minuten. Meng de inhoud van PVA fles met twee applicators.
  • Giet een beetje 'van de goed gemengde PVA-kruk mengsel op een papieren handdoek en laat staan ​​voor 3 minuten naar buiten PVA absorberen. Sla deze stap niet te verwijderen.
  • Met een applicator stok (of borstel), waarbij een gedeelte van de faeces van de papieren handdoek voor twee dia's en laten drogen gedurende enkele uren in een incubator op 37 ° of overnacht bij kamertemperatuur. Opmerking Het PVA kruk mengsel moet worden verspreid naar de randen van de schuif; Dit zal ertoe leiden dat de film zich te houden aan de dia tijdens de kleuring. Het is ook belangrijk om de objectglaasjes drogen te voorkomen dat het materiaal verwijderd gedurende kleuring te wassen.
  • De gedroogde glaasjes kan dan de jodium-alcohol ingevoegd. Geen behoefte om hen een 70% alcohol te geven voor het spoelen jodium-alcohol, omdat de uitstrijkjes PVA zijn al droog (in tegenstelling tot de natte uitstrijkjes die uit de fixeermiddel Schaudinn komen).

SAF bewaarde materiaal

  • SAF-kruk mengsel wordt grondig gemengd en gefiltreerd door kaasdoek in een 15 ml centrifugebuis.
  • Na centrifugatie (1 min bij 500 x g), wordt de bovenstaande vloeistof gedecanteerd. Hoewel de plekken voor C. parvum niet worden aanbevolen PVA geconserveerd materiaal, bedenk dan dat de snelheid van de hier getoonde centrifuge is waarschijnlijk niet genoeg om oöcysten te herstellen. centrifugeertijd en snelheid wordt aanbevolen als 10 minuten bij 500 x g. De uiteindelijke bezinksel moet ongeveer 0,5 tot 1,0 ml. Pas indien nodig herhalen van stap 1 of resuspendeer de pellet in een fysiologische zoutoplossing (0,85% NaCl) en het verwijderen van een deel van de schorsing.
  • Maak een uitstrijkje uit het sediment voor het kleuren vervolgens plaatsen 1 druppel Mayer albumine op de slede, waaraan wordt toegevoegd 1 druppel fecale sediment SAF bewaarde. Laat de uitstrijkjes drogen bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten voor kleuring. Het SAF uitstrijkje ontlasting kan ook worden gefixeerd in fixatief Schaudinn voordat kleuring (aanvang trichroomkleuring protocol spoelen met 70% alcohol voor jodium-alcohol).
  • Na het drogen kan het uitstrijkje direct worden ingevoerd in 70% alcohol (stap 4) kleuring procedure (stap jodium-alcohol kan worden geëlimineerd).
(0)
(0)